Đề tài So sánh kết quả chẩn đoán cysticercus cellulosae của bộ kit của bộ môn ký sinh trùng và bộ kit của biopharma – Phan Anh Tuấn

SO SAÙNH KEÁT QUAÛ CHAÅN ÑOAÙN CYSTICERCUS CELLULOSAE CUÛA BOÄ KIT CUÛA BOÄ MOÂN KYÙ SINH TRUØNG VAØ BOÄ KIT CUÛA BIOPHARMA Phan Anh Tuaán*, Traàn Thò Kim Dung*, Traàn Thò Thanh Nga** TOÙM TAÉT Thöïc hieän kyõ thuaät ELISA treân 139 maãu huyeát thanh ñeå phaùt hieän khaùng theå khaùng Cysticercus cellulosae goàm 32 maãu huyeát thanh cuûa nhöõng beänh nhaân maéc beänh Cysticercus cellulosae, 82 maãu huyeát thanh cuûa nhöõng ngöôøi khoâng maéc beänh Cysticercus cellulosae, 25 maãu huyeát thanh cuûa nhöõng ngöôøi nhieãm kyù sinh truøng khaùc. Kyõ thuaät ELISA coù ñoä nhaïy 100% vaø ñoä ñaëc hieäu 96,3%. So saùnh keát quaû chaån ñoaùn Cysticercus cellulosae giöõa boä kit cuûa Boä moân Kyù sinh truøng duøng khaùng nguyeân dòch nang vôùi boä kit cuûa Biopharma coù söï phuø hôïp cao (Kappa= 0,95) SUMMARY COMPARATIVE EVALUATION OF DEPARMENT OF PARASITOLOGY’S KIT AND BIOPHARMA ‘ S FOR THE DIAGNOSIS OF HUMAN CYSTICERCOSIS Phan Anh Tuan, Tran Thi Kim Dung, Traàn Thò Thanh Nga * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 9 * Supplement of No 1 * 2005: 100 – 105 The ELISA with antigen produced by Department of Parasitology- University of Medicine and Pharmacy in Ho Chi Minh City was perform on 139 serum samples; 32 from patients having cysticercosis, 82 from persons not having Cysticercus cellulosae, 25 from patients who infected other parasites.. Considering all 139 specimens, the ELISA had sensitivity of 100%. The specificity was 96,3%. Compare betweem the result of ELISA and the kit of Biopharma have high coresspond (Kappa=0,95). ÑAËT VAÁN ÑEÀ Beänh Cysticercus cellulosae laø beänh do nuoát tröùng thaûi ra bôûi saùn tröôûng thaønh. Cysticercus cellulosae coù theå gaëp ôû cô, ôû döôùi da ôû maét, ôû heä thaàn kinh trung öông. Beänh Cysticercus cellulosae ôû döôùi da, cô ñöôïc chaån ñoaùn tröïc tieáp baèng phöông phaùp sinh thieát(1). Beänh Cysticercus cellulosae ôû noäi taïng chaån ñoaùn khoù vì khoâng theå sinh thieát ñöôïc. Ngöôøi ta coù theå chaån ñoaùn beänh baèng hình aûnh hoïc nhö CT scanner, MRI nhöng chaån ñoaùn baèng hình aûnh hoïc ñaét tieàn, coù ñoä nhaïy thaáp, ñoâi khi khoù chaån ñoaùn phaân bieät vôùi toån thöông do caùc nguyeân nhaân khaùc. Xu höôùng ngaøy nay laø duøng phöông phaùp chaån ñoaùn huyeát thanh. Taïi Boä moân Kyù Sinh truøng, chuùng toâi ñaõ ñieàu cheá khaùng nguyeân töø Cysticercus cellulosae ñeå söû duïng trong kyõ thuaät ELISA chaån ñoaùn beänh vaø so saùnh keát quaû chaån ñoaùn vôùi boä kit cuûa Biopharma. VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP Phöông phaùp nghieân cöùu Nghieân cöùu thöïc nghieäm labo. Nguyeân vaät lieäu vaø duïng cuï Khaùng nguyeân Ñöôïc ñieàu cheá töø C. cellulosae ôû heo bò maéc töï nhieân. Huyeát thanh Coù 676 maãu HT goàm: + HT nhoùm beänh C. cellulosae (HT chöùng döông): Coù 6 maãu HT cuûa 6 beänh nhaân ñaõ ñöôïc xaùc ñònh beänh C. cellulosae + HT nhoùm chöùng (HT chöùng aâm) HT nhoùm chöùng goàm 43 maãu cuûa nhöõng ngöôøi * Boä moân Kyù sinh truøng Ñaïi hoïc Y Döôïc TP. HCM ** Beänh vieän Chôï Raãy TP. HCM 100 Nghieân cöùu Y hoïc Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005 khoûe maïnh. + HT nhoùm beänh kyù sinh truøng khaùc: goàm 113 maãu + HT nhoùm nghi ngôø maéc beänh kyù sinh truøng: goàm 514 Taát caû caùc maãu huyeát thanh naøy ñöôïc cho theâm Azid de Natri 0,5% vaø löu giöõ ôû nhieät ñoä –20oC. Tieán haønh nghieân cöùu - Ñieàu cheá KN: goàm 2 loaïi laø KN dòch nang vaø KN moâ nang. - Thöïc hieän kyõ thuaät ELISA, ñoïc keát quaû trò soá OD baèng maùy ñoïc ELISA ôû böôùc soùng 450nm. - Xaùc ñònh ñoä nhaïy, ñoä ñaëc hieäu, giaù trò tieân ñoaùn döông, giaù trò tieân ñoaùn aâm cuûa kyõ thuaät ELISA. - So saùnh keát quaû xeùt nghieäm phaùt hieän khaùng theå khaùng C. cellulosae cuûa kyõ thuaät ELISA vaø boä kit cuûa Biopharma. KEÁT QUAÛ Xaùc ñònh caùc thaønh phaàn trong kyõ thuaät ELISA Xaùc ñònh ñoä pha loaõng coäng hôïp Sau thôøi gian thöû nghieäm, chuùng toâi choïn 3 möùc ñoä pha loaõng coäng hôïp laø 1/10000, 1/20000 vaø 1/40000. Vôùi töøng noàng ñoä KN vaø hieäu giaù KT, chuùng toâi coù ñöôøng bieåu dieãn tæ soá OD+/OD- (OD+: trò soá OD nhoùm beänh, OD-: trò soá OD nhoùm chöùng) theo ñoä pha loaõng coäng hôïp nhö sau: 0 1 2 3 4 5 1/ 10 0 0 0 1/ 2 0 0 0 0 1/ 4 0 0 0 0 1/100 1/400 1/1600 1/6400 Noàng ñoä KN 26,25mcg/ml 1/100 1/400 1/1600 1/6400 0 1 2 3 4 5 1/ 10 0 0 0 1/ 2 0 0 0 0 1/ 4 0 0 0 0 Noàng ñoä KN 10,5mcg/ml 0 1 2 3 4 5 1/10000 1/20000 1/40000 Noàng ñoä KN 5,25mcg/ml 1/100 1/400 1/1600 1/6400 Bieåu ñoà 1: Tæ soá OD+/OD- theo hieäu giaù khaùng theå ôû caùc ñoä pha loaõng coäng hôïp. Cho thaáy ôû ñoä pha loaõng coäng hôïp 1/40000 tæ soá naøy thaáp nhaát, ôû 1/20000 vaø 1/10000 tæ soá naøy töông ñöông (P>0,05). Xaùc ñònh loaïi KN Chuùng toâi ñieàu cheá KN töø C. cellulosae thaønh 2 loaïi laø KN dòch nang vaø KN moâ nang. Thöïc hieän kyõ thuaät ELISA vôùi töøng loaïi KN vôùi caùc trò soá OD ño ñöôïc, chuùng toâi coù ñöôøng bieåu dieãn tæ soá OD+/OD- khi söû duïng KN dòch nang vaø KN moâ 0 1 2 3 4 5 1 / 1 0 0 0 0 1 / 2 0 0 0 0 1 / 4 0 0 0 0 1/100 1/400 1/1600 1/6400 Noàng ñoä KN 52,5mcg/ml 101 nang nhö sau: Bieåu ñoà 2: Tæ soá OD+/OD- theo hieäu giaù KT khi söû duïng KN dòch nang vaø KN moâ nang Cho thaáy KN dòch nang cho keát quaû coù trò soá OD vaø tæ soá OD+/OD- cao hôn KN moâ nang. Xaùc ñònh noàng ñoä KN söû duïng vaø hieäu giaù KT Bieåu ñoà 3: Tæ soá OD+/OD- theo noàng ñoä KN vaø hieäu giaù khaùng theå. Xaùc ñònh ngöôõng OD döông tính Thöïc hieän thöû nghieäm ELISA vôùi noàng ñoä KN 5,83 mcg/ml vaø hieäu giaù KT 1/800, ñoä pha loaõng coäng hôïp 1/20000 treân 43 maãu HT nhoùm chöùng, trò soá OD nhö sau: - Trò soá trung bình (X): 0,164 - Ñoä leäch chuaån (SD): 0,009. Trò soá OD döông tính ñöôïc tính: X + 3SD = 0,164 + (3 x 0,009) = 0,191 Vaäy moät maãu HT pha loaõng ôû hieäu giaù1/800 coù trò soá OD lôùn hôn 0,191 ñöôïc coi laø döông tính. Baûng 1: So saùnh trò soá OD cuûa kyõ thuaät ELISA khi duøng KN dòch nang vaø KN moâ nang vôùi HT beänh kyù sinh truøng khaùc Maãu HT beänh KN Trò soá OD theo hieäu giaù KTtöø 1/50 - 1/6400 Dòch nang 0,264 - 0,158 Toxocara spp. Moâ nang 0,317 - 0,181 Dòch nang 0,248 - 0,150 Entamoeba histolytica Moâ nang 0,301 - 0,174 Dòch nang 0,256 - 0,167 Strongyloides stercoralis Moâ nang 0,305 - 0,163 1/100 1/200 1/400 1/800 1/16001/32001/6400 0 5 1 5 2 2.5 3 3.5 4 5 0. 1. 4. 26,25mcg/ml 1/100 1/400 1/1600 1/6400 0 1 2 3 4 5 Dòch nang Moâ nang Noàng ñoä 105 mcg/ml 13,12 mcg/ml 8,75 mcg/ml 6,56 mcg/ml 5,83 mcg/ml 4,37 mcg/ml 1/100 1/400 1/1600 1/6400 Noàng ñoä 52,5 mcg/ml 0 1 2 3 4 5 Dòch nang Moâ nang 3,5 mcg/ml 0 1 2 3 4 5 1/100 1/400 1/1600 1/6400 Noàng ñoä 10,5 mcg/ml Dòch nang Moâ nang 1/100 1/400 1/1600 1/6400 0 2 4 6 Dòch nang Moâ nang Noàng ñoä 5,25 mcg/ml Chuyeân ñeà Ngoại Chuyeân Ngaønhi 102 Nghieân cöùu Y hoïc Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005 Maãu HT beänh KN Trò soá OD theo hieäu giaù KTtöø 1/50 - 1/6400 Dòch nang 0,228 - 0,161 Paragonimus spp. Moâ nang 0,312 - 0,194 Dòch nang 0,216 - 0,167 Fasciola spp. Moâ nang 0,318 - 0,212 Baûng 1 cho thaáy KN dòch nang ñaëc hieäu hôn. Baûng 2: Keát quaû ELISA cuûa caùc maãu HT nhoùm beänh, nhoùm chöùng, nhoùm nghi ngôø maéc beänh kyù sinh truøng vaø nhoùm caùc beänh kyù sinh truøng khaùc Keát quûa ELISA Maãu ht Soá maãu Döông tính Aâm tính Nhoùm beänh C. cellulosae 6 6 Nhoùm chöùng 43 43 Nhoùm nghi ngôø maéc beänh kyù sinh truøng 514 25 489 Nhoùm beänh kyù sinh truøng khaùc goàm113 maãu: Fasciola spp. 15 15 Strongyloides stercoralis 15 1 14 Paragonimus spp. 4 4 Toxocara spp 22 3 19 Entamoeba histolytica 19 1 18 Gnathostoma spp. 4 4 Giun moùc 15 15 Ascasis lumbricoides 13 13 T. solium 4 4 Vieâm maøng naõo do Cryptococcus spp. 2 2 Vôùi 6 maãu HT nhoùm beänh, thöû nghieäm Western Blot ñeàu döông tính vôùi 2 baêng protein coù troïng löôïng phaân töû 14.300 Dalton vaø 21.500 Dalton. - Vôùi 43 maãu HT nhoùm chöùng, choïn 10 maãu ngaãu nhieân: taát caû ñeàu aâm tính - Vôùi 514 maãu HT nghi ngôø maéc beänh kyù sinh truøng coù: - 25 maãu ELISA döông tính trong ñoù coù 2 tröôøng hôïp giaûi phaãu beänh lyù thaáy aáu truøng saùn vaø 23 tröôøng hôïp coøn laïi laøm thöû nghieäm Western Blot, taát caû ñeàu döông tính. - 489 maãu ELISA aâm tính, chuùng toâi choïn ngaãu nhieân 40 maãu ñeå thöû nghieäm baèng kyõ thuaät Western Blot, taát caû ñeàu aâm tính. Vaäy töø 514 maãu HT cuûa caùc beänh nhaân nghi ngôø maéc beänh kyù sinh truøng, chuùng toâi xaùc ñònh chaån ñoaùn ñöôïc 65 tröôøng hôïp goàm 25 tröôøng hôïp beänh vaø 40 tröôøng hôïp khoâng beänh. - Vôùi 113 maãu HT beänh do kyù sinh truøng khaùc coù: - 5 maãu ELISA döông tính, thöû nghieäm kyõ thuaät Western - Blot, keát quaû: - 4 maãu Western Blot aâm tính: 4 tröôøng hôïp ELISA döông tính giaû. - 1 maãu Toxocara sp. coù keát quaû Western Blot döông tính. Vaäy ñaây laø tröôøng hôïp ña nhieãm. - 108 maãu ELISA aâm tính, chuùng toâi choïn ngaãu nhieân 2 maãu ôû moãi loaïi beänh kyù sinh truøng; toång soá 20 maãu cuûa 10 loaïi beänh treân, thöû nghieäm vôùi kyõ thuaät Western - Blot, taát caû ñeàu aâm tính. Nhö vaäy töø 113 tröôøng hôïp maéc beänh do kyù sinh truøng khaùc, baèng kyõ thuaät Western Blot, chuùng toâi xaùc ñònh chaån ñoaùn ñöôïc 25 tröôøng hôïp goàm 1 tröôøng hôïp beänh vaø 24 tröôøng hôïp khoâng beänh. Xaùc ñònh ñoä nhaïy, ñoä ñaëc hieäu, giaù trò tieân ñoaùn döông, giaù trò tieân ñoaùn aâm cuûa kyõ thuaät ELISA Ñeå xaùc ñònh ñoä nhaïy, ñoä ñaëc hieäu, giaù trò tieân ñoaùn döông, giaù trò tieân ñoaùn aâm cuûa kyõ thuaät ELISA, toång hôïp 139 maãu ñaõ xaùc ñònh chaån ñoaùn Baûng 3: Keát quaû ELISA cuûa 139 maãu HT ñöôïc xaùc ñònh chaån ñoaùn Beänh ELISA Coù Khoâng Toång coäng Döông tính 32 4 36 AÂm tính 103 103 Toång coäng 32 107 139 Ñoä nhaïy: %1001 32 32 a a === c+ Ñoä ñaëc hieäu: %3,96963,0 107 103 db d ===+ 103 Giaù trò tieân ñoaùn döông: %9,88889,0 36 32 a a ===+ b Giaù trò tieân ñoaùn aâm: %1001 103 103 dc d ===+ So saùnh keát quaû xeùt nghieäm phaùt hieän khaùng theå khaùng C. cellulosae cuûa kyõ thuaät ELISA vaø boä kit cuûa Biopharma Chuùng toâi ñaõ coù keát quaû ELISA cuûa 42 maãu HT goàm 15 maãu aâm tính vaø 27 maãu döông tính. Caùc maãu naøy ñöôïc laøm thöû nghieäm taïi Beänh vieän Chôï Raãy vôùi boä kit chaån ñoaùn cuûa Biopharma, keát quaû nhö sau: Baûng 4: Keát quaû xeùt nghieäm cuûa kyõ thuaät ELISA vaø boä kít cuûa Biopharma Keát quaû cuûa boä kit ELISA AÂm tính Döông tính Toång coäng AÂm tính 15 15 Döông tính 1 26 27 Toång coäng 16 26 42 Chæ soá Kappa K = (Po – Pe)/ (1- Pe) Vôùi Po = (a+d) / N = (15+26) / 42 = 0,976 Vaø Pe=((r1s1+r2s2)/N)/N=((15x16+26x27)/42)/42=0,534 K = (0,976 – 0,534)/ (1- 0,534)= 0,95 Chæ soá Kappa: K =0,95; cho thaáy keát quaû xeùt nghieäm cuûa kyõ thuaät ELISA vôùi KN dòch nang vaø boä kit cuûa Biopharma coù söï phuø hôïp cao. BAØN LUAÄN Veà ñoä nhaïy cuûa kyõ thuaät ELISA Döïa treân döõ kieän 139 maãu HT thöû nghieäm ñaõ ñöôïc xaùc ñònh chaån ñoaùn, keát quaû phaân tích theo baûng 2 x 2 (baûng 3) cho bieát kyõ thuaät ELISA coù ñoä nhaïy laø 100% vaø ñoä ñaëc hieäu laø 96,3%, giaù trò tieân ñoaùn döông 88,9%, giaù trò tieân ñoaùn aâm 100%. Keát quaû nghieân cöùu cuûa caùc taùc giaû khaùc cho bieát ñoä nhaïy cuûa kyõ thuaät ELISA trong chaån ñoaùn beänh C. cellulosae töø 88,6% - 100%(3,4,813,14,16). Coù söï bieán thieân veà ñoä nhaïy coù theå do: - Loaïi nang saùn ñeå ñieàu cheá khaùng nguyeân: chaån ñoaùn mieãn dòch vôùi kyõ thuaät ELISA ngoaøi khaùng nguyeân ñieàu cheá töø Cysticercus cellulosae, caùc taùc giaû khaùc ñaõ ñieàu cheá khaùng nguyeân töø caùc loaøi khaùc nhö Cysticercus longicollis(2,6). - Caùc thaønh phaàn cuûa nang saùn: Töø nang saùn Cysticercus cellulosae coù theå ñieàu cheá thaønh 3 loaïi khaùng nguyeân laø khaùng nguyeân toaøn nang, dòch nang vaø khaùng nguyeân noäi ngoaïi tieát. Theo nghieân cöùu cuûa Guo H. (1997) vaø Molinari J. L. (2002) thì ñoä nhaïy cuûa kyõ thuaät ELISA khi duøng KN noäi -ngoaïi tieát töø 51,1% - 92% (9), (11). Theo caùc nghieân cöùu cuûa Costa J. M. (1986) vaø Shiguekawa K. Y. (2000), khi duøng KN dòch nang thì ñoä nhaïy töø 95% - 100%(3,13), coøn caùc taùc giaû Costa J. M. (1986), Dekumyoy P. (1998), Silva A. D. (2000), Gekeler F. (2002), Wang K. H. (1993) duøng KN ø toaøn nang thì ñoä nhaïy töø 85,7% - 100%(3,4,8,14,16). - Hôn nöõa, ñoä nhaïy cuûa kyõ thuaät ELISA coøn tuøy thuoäc vaøo beänh nhaân thöû nghieäm. Diawan söû duïng cuøng moät khaùng nguyeân ñeå chaån ñoaùn thì thaáy ñoä nhaïy cuûa kyõ thuaät ELISA laø 79% töø caùc huyeát thanh cuûa caùc beänh nhaân ôû Mexico vaø 61% ôû caùc huyeát thanh cuûa caùc beänh nhaân ôû Irian Jaya-Indonesia(5). Ñoä ñaëc hieäu cuûa kyõ thuaät ELISA trong coâng trình nghieân cöùu naøy laø 96,3%. So vôùi caùc nghieân cöùu duøng KN toaøn nang thì ñoä ñaëc hieäu cuûa kyõ thuaät ELISA töø 75,3% - 100%(3,4,8,13). Ko R. C. (1998), Molinari J. L. (2002) duøng chaát noäi - ngoaïi tieát laøm KN thì kyõ thuaät ELISA coù ñoä ñaëc hieäu töø 97% - 100%(10,11) vaø Costa (1986), Bueno E. C. (2000) duøng dòch nang laøm KN, ñoä ñaëc hieäu töø 90% - 100%(2,3). Ñoä ñaëc hieäu cuûa kyõ thuaät ELISA trong caùc nghieân cöùu khaùc nhau. Ñieàu ñoù coù theå laø do chaát löôïng KN vaø tình traïng maéc beänh kyù sinh truøng khaùc taïi nôi ñang nghieân cöùu coù khaùc nhau. Veà phaûn öùng cheùo Khi duøng kyõ thuaät ELISA thöû nghieäm treân caùc huyeát thanh cuûa caùc beänh nhaân beänh kyù sinh truøng khaùc cho thaáy phaûn öùng coù cheùo vôùi caùc beänh do Entamoeba histolytics, Toxocara canis, Strongyloides stercoralis vôùi tæ leä thaáp (baûng 2). Chuyeân ñeà Ngoại Chuyeân Ngaønhi 104 Nghieân cöùu Y hoïc Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005 Ngoaøi phaûn öùng cheùo vôùi Entamoeba histolytics, T. canis theo keát quaû nghieân cöùu cuûa caùc taùc giaû khaùc, phaûn öùng coøn cheùo vôùi Echinococcus spp, Schistosoma spp., Ascaris lumbricoides, Trichinella spiralis(4,8,13). So saùnh keát quaû chaån ñoaùn Cysticercus cellulosae cuûa kyõ thuaät ELISA vaø boä kit cuûa Biopharma Keát quaû xeùt nghieäm phaùt hieän khaùng theå khaùng C. cellulosae cuûa kyõ thuaät ELISA vôùi khaùng nguyeân dòch nang so saùnh vôùi boä kit cuûa Biopharma coù söï phuø hôïp cao (Kappa= 0,950) (baûng 2.4) KEÁT LUAÄN Kyõ thuaät ELISA vôùi khaùng nguyeân dòch nang laø kyõ thuaät coù ñoä nhaïy, ñoä ñaëc hieäu cao, ñaùng tin caäy, thöïc hieän nhanh vaø töông ñoái ñôn giaûn, khoâng caàn nhöõng trang thieát bò ñaét tieàn, coù theå thöïc hieän ôû nhöõng phoøng thí nghieäm nhoû vaø ñaây laø thöû nghieäm reû tieàn coù ích goùp phaàn trong chaån ñoaùn xaùc ñònh beänh. Keát quaû xeùt nghieäm phaùt hieän khaùng theå cuûa kyõ thuaät ELISA vôùi khaùng nguyeân dòch nang so saùnh vôùi boä kit cuûa Biopharma coù söï phuø hôïp cao. Tuy nhieân vaãn coøn nhieàu caâu hoûi ñaët ra maø kyõ thuaät ELISA chöa traû lôøi ñöôïc. Tröôøng hôïp naøo vôùi keát quaû ELISA xaùc ñònh ñöôïc raèng beänh nhaân nhieãm nhieàu nang hay ít nang, vôùi keát quaû ELISA döông tính coù theå xaùc ñònh ñoù laø beänh môùi maéc hay beänh maõn tính? ELISA döông tính thì coù theå naøo xaùc ñònh beänh aáu truøng saùn daûi heo trong giai ñoaïn tieán trieån hay thoaùi hoùa? Neáu phaûn öùng döông töø 2 loaïi khaùng nguyeân kyù sinh truøng thì ñoù laø ña nhieãm hay chæ laø phaûn öùng cheùo? Ñaây laø nhöõng vaán ñeà maø chuùng toâi seõ nghieân cöùu trong thôøi gian tôùi. TAØI LIEÄU THAM KHAÛO 1 Baily GG (1988), “Serological diagnosis of neurocysticercosis: evaluation of ELISA tests using cyst fluid and other components of Taenia solium cysticerci as antigen”, Trans R Soc Trop Med Hyg, 82 (2), pp. 295-299. 2 Bueno E.C. et al. (2000), “Specific Taenia crassiceps and Taenia solium antigenic peptides for neurocysticercosis immunodiagnosis using serum samples”, J Clin Microbiol, 38(1), pp. 146-151. 3 Costa J. M. (1986), “Immunoenzymatic test (ELISA) in the diagnosis of neurocysticercosis: study of various antigenic extracts in the detection of IgG antibodies in serum and cerebrospinal fluid samples”, Arq Neuropsiquiatr, 44(1), pp. 15-31. 4 Dekumyoy P. et al. (1998) “Use of delipidized antigens of Taenia solium metacestodes in IgG-ELISA for detection of neurocysticercosis”, Southeast Asian J Trop Med Public Health, 29(3), pp. 572-578. 5 Diwan A., Coker Vann M., Brown P. et al. (1982), “Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the dection of antibody to cysticerci of Taenia solium”, Am J Trop Med Hyg, 31, pp. 364-369. 6 Garcia E., Ordonez G., Sotelo J. (1995), “Antigens from Taenia crassiceps used in complement fixation, enzyme – linked immunosorbent assay, and Western Blot (immunoblot) for diagnosis of neurocysticercosis, J Clin Microbiol, 33(12), pp. 3324-3325. 7 Garcia H. H. et al. (1998), “A specific antigen detection ELISA for the diagnosis of human neurocysticercosis” Trans Royal Soc. Trop Med Hyg, 92, pp. 411-414. 8 Gekeler F. et al. (2002), “Sensitivity and Specificity of ELISA and Immunoblot for Diagnosing Neurocysticercosis”, Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 21, pp. 227-229. 9 Guo H., Zhao Z. F., Shi D. Z. (1997), “A study on the culture medium antigens of Cysticercus cellulosae for detecting antibodies of cysticercosis by means of ELISA”, Southeast Asian J Trop Med Public Health, 28 Suppl 1, pp. 125-127. 10 Ko RC, Ng TF (1998), “Evaluation of excretory/secretory products of larval Taenia solium as diagnostic antigens for porcine and human cysticercosis”, Journal of Helminthology, 72, pp. 147-154. 11 Molinari J. L. et al. (2002), “Discrimination between active and inactive neurocysticercosis by metacestode excretory/secretory antigens of Taenia solium in an anzyme-linked immunosorbent assay”, Am J Trop Med Hyg, 66(6), pp. 777-781. 12 Shasha et al. (1991), “Sero-epidemiological studies of cysticercosis in school children from two rural areas of Transkei, South Africa”, Annal of Tropical Medicine and Parasitology, 85, pp. 349-355. 13 Shiguekawa K.Y. et al. (2000), “ELISA and Western Blotting tests in the detection of IgG antibodies to Taenia solium metacestodes in serum samples in human neurocysticercosis”, Trop Med Int Health, 5(6), pp. 443-449. 14 Silva A. D. et al (2000), “A quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the immunodiagnosis of neurocysticercosis using a purified fraction from Taenia solium cysticerci”, Diagn Microbiol Infect Dis., 37(2), pp. 87-92. 15 Sloan L., Schneider S., Rosenblatt J. (1995), “Evaluation of enzyme – linked immunoassay for serological diagnosis of cysticercosis”, J Clin Microbiol, 33(120), pp. 3124-3128. 16 Wang K. H., Xu Z. Y., Zeng D. K. (1993), “Comparative study on antigens of Cysticercus cellulosae by EITB and ELISA”, Chin J Parasitol Parasit Dis, 11, pp. 53-5. 105